群迈公司产品研发部门同仁:
甲流疫情最新动态:呈扩大势头
进入秋季后,内地甲流发病人数快速上升,每日新增病例已突破500人,截止9月25日,我国内地31个省市自治区累计报告15968例甲型H1N1流感确诊病例。疫情已由输入为主变为本土为主,9.1-9.25新增的12211例病例中的98.94%是本土感染病例。尤其是随着9月份学校开学, 各地出现甲流的聚集性爆发,内地累计报告了207起聚集性疫情,学校和学生活动相关的疫情报告有179起,占整个聚集性疫情从沿海向全国、从城市向农村扩散。
针对目前严峻的甲流疫情形势,我公司积极响应卫生部颁布的《人猪流感(H1N1)病例标本采集和实验室检测指南(暂行)》方针法规定于2009年9月27号集中学习“指南”内容,领会卫生部精神,对群迈标准PCR实验室进行技术讨论,以配合现阶段迫切的实验需求。
注:人猪流感(H1N1)病例标本采集和实验室检测指南(暂行)来源: 中华人民共和国卫生部
猪流行性感冒(H1N1病毒)病毒的检测
所有猪流行性感冒(H1N1病毒)疑似病例应该采集上呼吸道标本来检测猪流行性感冒(H1N1病毒)的病毒。
推荐采集的呼吸道标本
疾病发病后应尽快采集如下标本:鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔冲洗液/吸取物。如果不能收集这些标本,可合并鼻拭子与口咽拭子。气管插管的病人也应收集 气管吸取物。标本应置于无菌病毒运输液(VTM),并立即用冰块或冰排保存或置于4℃(冰箱),并马上运送至实验室。临床样品收集人员及实验室人员的 感染控制指导请见相关文件。
拭子
理想的情况下,标本应使用头部为合成纤维的拭子(例如,聚酯纤维),用铝或塑料做杆。不推荐棉拭子和木杆。不能用海藻酸钙做的拭子收集标本。标本 采集管应包含3毫升病毒运输液(例如,含有蛋白质稳定剂,阻止细菌和真菌生长的抗生素,缓冲液)。
临床标本储存
所有呼吸道标本应保存在4℃,并尽快放置在-70℃。如果没有-70℃度冰箱,标本应保存在4℃,但不应超过4天。
临床标本运输
临床标本应按照A类包装要求运送,并用干冰运输。 所有标本应标示清楚。疑似病例标本运送应包含的信息请参照禽流感标本运输。
检测程序
呼吸道标本应首先应用real time RT-PCR方法检测A型流感病毒的M基因、Swine(H1N1)的HA基因和NP基因,以及质控对照RNP基因。同时,接种MDCK细胞或 SPF鸡胚进行病毒分离,并测定病毒的全基因组序列。
推荐的检测方法
用Real-time RT-PCR方法检测猪流行性感冒(H1N1病毒)病毒。
其他检测方法
快速流感抗原检测一些商用快速检测可以区分A和B型流感病毒。快速检测实验A型流感阳性的病例符合可能病例的标准(见上文)。这些实验对检测人感 染猪流行性感冒(H1N1病毒)病毒临床标本的敏感性和特异性未知,而且检测季节性流感病毒的灵敏度不佳。因此,快速检测阴性结果可能是假阴性,不能作为猪流感感染的最后诊断。
免疫荧光法(或装配的IFA)免疫荧光试验可以区分A和B型流感病毒。检测A型流感阳性的病例符合可能病例的标准(见上文)。免疫荧光试验的结果取决 于临床标本的质量,操作技能,对检测人感染猪流行性感冒(H1N1病毒)病毒临床标本的敏感性和特异性未知。因此,免疫荧光试验阴性结果可能是假阴性 ,不能作为猪流感感染的最后诊断。
病毒培养 可用MDCK细胞和SPF鸡胚分离猪流感(H1N1病毒)病毒可以诊断感染,但无法为临床诊断及时提供结果。病毒分离阴性并不能排除感染猪流感(H1N1病毒)病毒