实时PCR(real—time polymerase chain reaction)又称荧光定量PCR或TaqMan PCR，是美国PE公司(Perkin Elmer)于1995年研制出的一种新的核酸定量技术。该技术在常规PCR基础上运用荧光能量传递(fluorescence resonance energy transfer，FRET)技术，加入荧光标记探针，巧妙地把核算扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起，借助于荧光信号来检测PCR产物。一方面提高了灵敏度，另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据，建立实时扩增曲线，准确地确定CT值，从而根据CT值确定起始DNA的拷贝数，做到真正意义上的DNA定量。另外由于CT值是一个完全客观的参数，CT值越小，模版DNA的起始拷贝数越小。因此，利用CT值确定DNA拷贝数实时PCR方法比普通终点定量方法更加准确。

    实时荧光定量PCR要用定量PCR仪，目前常见的仪器有PE公司的PE系列，罗氏公司的Lightcycle系列，Robbett公司的RG系列。而根据荧光化学原理不同可分为DNA结合染色、TaqMan技术、Amplisensor、分子灯塔、复合探针法、杂交探针、自身谇灭技术等。目前，荧光定量PCR已被应用与病原体测定、免疫分析、肿瘤基因测定、基因表达、突变和多态性研究。